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Buffer瓶的制備方法和步驟

  Buffer瓶(ping)的(de)制備(bei)方法(fa)和(he)步驟實際上是(shi)指緩沖液(Buffer Solution)的(de)配(pei)制過程,并將其儲存在特定的(de)容器中(如試(shi)劑(ji)瓶(ping)),以便后續(xu)實驗使用。
由于(yu)“Buffer瓶”這一表述可能指的是裝有緩沖液(ye)(ye)的容器,以(yi)下我將詳細介紹(shao)一種(zhong)常見緩沖液(ye)(ye)——TBE(Tris/Borate/EDTA)電泳緩沖液(ye)(ye)的配制
方(fang)法和步驟(zou),以及一般性的緩沖液儲存建議(yi)。
TBE電(dian)泳(yong)緩沖液的配制方(fang)法
一、準備工作
準(zhun)備所(suo)需(xu)材(cai)料(liao):Tris堿、硼酸、EDTA(通常(chang)使用(yong)EDTA二鈉(na)鹽)、去離子(zi)水、容量瓶(ping)(如1L)、燒杯(bei)、磁力攪(jiao)拌器(可選)、pH計(可選,但(dan)
TBE緩沖(chong)液通(tong)常(chang)不需要精確調節pH)。
清洗所有玻(bo)璃器(qi)皿,確保無雜(za)質(zhi)。
二、配(pei)制步驟
1 . 準確(que)稱取組(zu)分:
Tris堿:54g
硼酸:27.5g
EDTA二(er)鈉鹽(注意:EDTA二(er)鈉鹽需要先用少量去(qu)離(li)子水(shui)溶解(jie),因為(wei)EDTA在水(shui)中的溶解(jie)度較(jiao)低,且加入NaOH有(you)助于溶解(jie)):3.72g(如果
使(shi)用EDTA二鈉鹽八(ba)水合物(wu),則為(wei)2.92g)
2 . 溶(rong)解(jie):
將稱好的Tris堿和硼酸加(jia)入(ru)燒杯(bei)中(zhong),加(jia)入(ru)約800mL的去(qu)離子水。
使用(yong)磁(ci)力攪(jiao)拌(ban)器充分攪(jiao)拌(ban),直至完全(quan)溶(rong)解。
將EDTA溶(rong)液(如(ru)果之(zhi)前單獨溶(rong)解(jie))緩慢加入燒杯中,繼續攪拌(ban)至混合均勻。
3 . 定容(rong):
將溶液(ye)轉移(yi)至容(rong)量瓶中,用去離子水清(qing)洗燒杯2次(ci),將清(qing)洗液(ye)也(ye)一并移(yi)入(ru)容(rong)量瓶。
繼續加(jia)入去離子(zi)水,直(zhi)至(zhi)溶液體積達到(dao)容(rong)量瓶的(de)刻(ke)度線。
輕輕搖晃容量瓶,使溶液混(hun)合均勻。
4 . 儲(chu)存:
將配制好的TBE緩沖(chong)液(ye)轉移至干凈的試劑瓶中,貼(tie)上(shang)標簽,注明名(ming)稱、濃度、配制日期等信息(xi)。
室溫保存(cun),避(bi)免陽光直射。TBE緩沖液(ye)可(ke)以穩定儲存(cun)數月,但建議定期檢查是否有沉(chen)淀或變色。
三、一般性(xing)緩沖液儲(chu)存建(jian)議
1 . 溫度控(kong)制:根據(ju)緩沖(chong)液(ye)的性質,可能需要(yao)冷藏或室(shi)溫保存(cun)。遵循具體緩沖(chong)液(ye)的儲存(cun)要(yao)求(qiu)。
2 . 定期(qi)檢查:定期(qi)檢查緩沖液是否有(you)沉(chen)淀、變色或(huo)異味,這些(xie)都可能是變質的跡象。
3 . 無(wu)菌(jun)處理:對于需(xu)要無(wu)菌(jun)的緩(huan)沖液,應在無(wu)菌(jun)條件(jian)下(xia)配制和儲存,并加入適當的防腐劑以防止微(wei)生物污(wu)染。
4 . 避光(guang)保(bao)存:許多緩(huan)沖液對(dui)光(guang)敏感(gan),應儲存在棕色(se)或深色(se)試劑瓶中(zhong),并置于陰涼處。
請注意,不同類型的(de)緩沖(chong)液其配制方(fang)法和儲(chu)存(cun)條(tiao)件(jian)可能有(you)所不同,因此(ci)在實際操作時(shi)應參考(kao)具體的(de)實驗(yan)指南或試劑說明書。
 